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水貂阿留申病检测PCR和CIEP方法优缺点

分类:
知识分享
2020/04/03 15:21
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【摘要】:
水貂阿留申病检测PCR和CIEP方法优缺点

水貂阿留申病是影响水貂养殖业的三大疫病之一。临床症状与病毒基因型和水貂日龄有关;仔貂表现为急性肺炎;成年貂表现为终生毒血症、全身淋巴细胞增殖、血清免疫球蛋白增多、肾小球肾炎、动脉血管炎。

水貂阿留申病的检测方法主要有:CIEP、PCR、ELISA等。其中CIEP为目前阿留申病检测的金标准,也是目前普遍使用的检测方法,但近年来国内也有好多人使用PCR方法对水貂阿留申病进行诊断,现就两种方法进行比较:

1.PCR检测的准确性与取样部位有关。国外研究表明取脾脏进行PCR检测:PCR阳性的100个样品中,CIEP检测为阳性的为99个,1个为阴性(分析阴性原因为血样污染抗体降解);而PCR阴性的57个样品中有10个为CIEP阳性。PCR对淋巴结进行检测:75个PCR阳性样品中,74个为CIEP阳性,1个为阴性(分析阴性原因为血样污染抗体降解);90个PCR阴性样品中,89个为CIEP阳性,1个为CIEP阴性。而同时取两个部位:脾脏及淋巴结进行PCR检测,结果与CIEP结果一致性为94.7%。而早期实验显示,对CIEP阳性的水貂进行多次PCR检测,可以表现出高比例的PCR阴性,或者间歇性PCR阴性结果。这可能与病毒感染水貂后,由于抗体的作用,病毒在水貂体内复制受到限制有关。

2.PCR可以检测到早期感染阿留申的水貂。在抗体产生之前的早期阶段,CIEP无法检测到抗体,提取脏器用PCR的方法可以早检测到。抗体产生的时间取决于AMDV毒株和水貂的品种。野生水貂感染丹麦AMDV毒株后,需要1个月的时间产生抗体。蓝宝石貂感染AMDV-Utah和短毛黑貂感染AMDV-Kirkegaard,于感染后5 ~ 10天可检测到抗体。一般在感染2~7周后,病貂可以检测到抗体。通常情况下,彩貂产生抗体的时间比蓝宝石貂更早。

由上可见,用PCR检测AMDV,脏器检测比较准确,血样检测假阴性高。而CIEP检测,受血样保存的影响,血样保存不好有污染,会造成假阴性。在感染早期,抗体产生之前,CIEP方法不适用。